先將生物樣品在液氮中(-196℃)進行快速冷凍，防止形成冰晶。然后將冷凍的樣品迅速轉移到冷凍裝置中，并迅速抽成真空。在真空條件下，用冰刀橫切冰凍樣品，使樣品內層被分開露出兩個表面。如用冰刀切開細胞膜時，分開的兩個面分別稱為P面(protoplasmic face)和E面(exoplasmic face)，P面是靠近細胞質一面的半層膜，而E面則是靠近細胞外基質面的半層膜，可清楚地觀察到鑲嵌蛋白。